1.磁懸浮培養(yǎng):
磁懸浮是在體外創(chuàng)建天然組織環(huán)境的簡便工具。通過過夜孵育將細(xì)胞用NanoShuttleTM-PL進(jìn)行磁化并分配到具有細(xì)胞排斥表面的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板中,在容器上方添加磁力使細(xì)胞懸浮。當(dāng)懸浮過程中,細(xì)胞從孔底脫離,磁力相當(dāng)于一種不可見的支架,可以迅速聚集細(xì)胞,并且促進(jìn)細(xì)胞間的相互作用,誘導(dǎo)ECM合成。磁懸浮法已成功應(yīng)用于制備不同類型細(xì)胞的3D培養(yǎng)物,包括細(xì)胞系、干細(xì)胞和原代細(xì)胞。該技術(shù)的基本應(yīng)用是在不同環(huán)境條件下進(jìn)行3D細(xì)胞培養(yǎng)。
2.磁性生物模印培養(yǎng):
與磁懸浮培養(yǎng)不同,磁性3D生物模印技術(shù)是將細(xì)胞與NanoShuttleTM-PL孵育過夜后,將微孔板放置在磁體架上,從而將磁化的細(xì)胞模印成球狀體。每個(gè)孔下方的磁鐵利用溫和的磁力來誘導(dǎo)細(xì)胞聚集并在每個(gè)孔的底部模印成球狀體。15分鐘至幾小時(shí)后,含有球狀體的培養(yǎng)板可以從磁力架上移除并在無磁力的情況下長期培養(yǎng)。 該系統(tǒng)能夠快速形成球狀體,克服了其他平臺(tái)的限制因素,并且球狀體的尺寸具有可重復(fù)性,不限制于細(xì)胞類型,同時(shí)還可以擴(kuò)展至高通量(96和384孔)。利用磁性3D生物模印技術(shù),能模印出結(jié)構(gòu)緊密并可繼續(xù)培養(yǎng)生長的細(xì)胞球狀體,可使用商品化的試劑盒持續(xù)檢測(cè)促進(jìn)細(xì)胞活性和其他功能。3D模印方法以及商品化的標(biāo)準(zhǔn)試劑盒為高通量化合物篩選提供了理想的組合。然后使用常用的生物學(xué)研究方法進(jìn)行分析,例如免疫組化和免疫印跡。