熒光定量pcr儀由熒光定量系統(tǒng)和計算機組成,用來監(jiān)測循環(huán)過程的熒光。與實時設備相連的計算機收集熒光數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)通過開發(fā)的實時分析軟件以圖表的形式顯示。原始數(shù)據(jù)被繪制成熒光強度相對于循環(huán)數(shù)的圖表。原始數(shù)據(jù)收集后可以開始分析。實時設備的軟件能使收集到的數(shù)據(jù)進行正?;幚韥韽浹a背景熒光的差異。正?;罂梢栽O定域值水平,這就是分析熒光數(shù)據(jù)的水平。
熒光定量pcr儀作為一種高精度檢測儀器,長期使用必須注意及時維護保養(yǎng)工作。那么熒光定量儀器的日常清理和保養(yǎng)應該怎么做呢?下面,艾泰赫生化科技為大家詳細講解一下。
1、儀器外部清潔
用潔凈毛巾擦拭儀器外殼,將儀器挪開原先的位置,清理儀器下面的桌面,以免桌面上積攢的灰塵等雜物堵住通風口。
檢查熒光定量PCR儀進風口以及出風口是否通暢(具體位置可參見儀器廠家的說明書),以免通風口被灰塵、纖維等雜物堵塞而造成散熱不好,從而影響儀器升降溫速度和溫控精度。
儀器周圍需要留出一定的空間以保證良好的通風散熱,具體要求可參見儀器廠家的說明書,德國耶拿公司的PCR儀背部要求留出10cm的空間,但側(cè)面不排風,因此儀器左右兩側(cè)可以近距離放置其他儀器設備,節(jié)省實驗室空間。
2、樣品槽清潔
檢查熒光定量PCR儀樣品槽是否潔凈,可用蘸有70%-75%的棉簽擦拭樣品孔,再在25℃下運行3min,以蒸干槽內(nèi)的酒精溶液。定期清潔樣品槽,建議半年1次。
若是定量PCR儀,樣品孔中若被帶有熒光染料的樣品溶液污染,會影響實際樣品的檢測結(jié)果,所以更需要保證樣品槽的潔凈,建議3個月一次。
3、熱蓋清潔
檢查熱蓋是否能夠卡緊扣好,以保證程序運行過程中樣品沒有蒸發(fā)現(xiàn)象。
PCR管蓋上的記號筆標記容易在熱蓋上留下印漬,可定期用蘸有70%-75%酒精的柔軟潔凈布進行擦拭,并將熱蓋升溫至99℃保溫3min,以去除酒精殘留。
4、測溫
樣品槽溫度的均一性和準確性關乎實驗結(jié)果的好壞,建議由專業(yè)的售后工程師定期對樣品槽進行溫度測定,以保證儀器溫控性能正常(尤其是使用3年以上的儀器)。
熒光定量PCR儀在運行過程中,禁止強行切斷電源來結(jié)束程序(突遇停電等意外除外),因為電源切斷后,風扇強制停止,導致儀器內(nèi)部元器件散熱不順暢,影響元器件使用壽命。